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貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

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【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

Name:Diagnostic Kit for Feline derived ingredients DNA(Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】10T/盒           

                                                  

【預期用途】本試劑盒適用于動物組織以及食品、飼料等樣本中貓源性成分的檢測。檢測結(jié)果僅供參考。

 

【檢驗原理】本試劑盒采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術,用SB/T 10923-2012中的貓源性成分特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR技術對貓源性成分特異性引物的DNA進行體外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。

 

【試劑組成】

包裝規(guī)格

25T/盒

50T/盒

Feline反應液

     500μL×1管

     500μL×2管

酶液

       25μL×1管

       50μL×1管

Feline陽性質(zhì)控品

      50μL ×1管

      50μL ×1管

陰性質(zhì)控品

     250μL ×1管

     250μL ×1管

 

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過5次,有效期12個月。

 

適用儀器ABI 、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列熒光定量PCR檢測儀。

 

【標本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約1g。

 

【保存和運輸】上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過6個月,標本運送應采用2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

 

使用方法

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

取動物組織及其制品、食品或飼料約1g,手術剪剪碎混勻后取0.5g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5mL滅菌離心管中,8000rpm離心2min,取上清液100μL于1.5mL滅菌離心管中。

1.2 核酸提取

推薦采用廣州維伯鑫生物科技股份有限公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取,請按照試劑說明書進行操作。

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照;樣品每滿10份,多配制1份),每測試反應體系配制如下表:

試劑

Feline反應液

酶液

用量(樣本數(shù)為N)

20μL

1μL

 

將混合好的測試反應液分裝到PCR反應管中,21uL/管。

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟1提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR擴增(核酸擴增區(qū))

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內(nèi);

4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為25μL;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI系列儀器請勿選擇ROX參比熒光,選擇None即可。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設置:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec


注意事項

1.所有操作嚴格按照說明書進行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化,完全混勻并短暫離心;

3.反應液應避光保存;

4.反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;

7.實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。

 

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱:廣州維伯鑫生物科技股份有限公司 郵 編:510663

生產(chǎn)地址:廣州高新技術產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)科學城科豐路31號G11棟201號

電子郵箱:info@vipotion.com 電 話:020-66377266

公司網(wǎng)址:http:// 傳 真:020-66377267


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